GB5009.258-2016食品安全国家标准食品中棉子糖的测定内容是什么?百检网检测范围广泛，可根据客户需求选择合适的检测标准及项目安排检测，全国近千家合作实验室，CMA/CNAS资质齐全，可就近安排寄样检测。今天百检网就给大家简单介绍一下GB5009.258-2016食品安全国家标准食品中棉子糖的测定标准内容。

1.范围

本标准规定了食品中棉子糖含量测定的离子色谱方法。

本标准适用于婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、婴幼儿罐装辅助食品、饮料及豆粉食品中棉子糖含量的测定。

2.原理

试样采用乙腈沉淀、高速离心的方式去除样品中的蛋白质和脂肪,经固相萃取柱净化后,注入离子色谱仪,氢氧化钠溶液为淋洗液,经阴离子交换柱分离,脉冲安培检测器检测。保留时间定性,外标法定量。

3.试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为优级纯,水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂

3.1.1 乙腈(C2H3N):色谱纯。

3.1.2 50%氢氧化钠溶液(NaOH):色谱纯。

3.1.3 α-淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。

3.1.4 氮气(N2):纯度≥99.99%。

3.2 试剂配制

氢氧化钠溶液(250mmol/L):在2L塑料试剂瓶中加入500mL经过0.22μm尼龙滤膜过滤的蒸馏水,移取13.lmL氢氧化钠(3.1.2)溶液至水面以下,加蒸馏水至1000mL,通亼氮气保护后,摇匀备用。

3.3 标准品

棉子糖标准品(C18H32O16):纯度≥99.0%。

3.4 标准溶液配制

3.4.1 标准储备溶液(l000mg/L):准确称取棉子糖l00mg(*到0.1mg)于50mL烧杯中,用蒸馏水溶解,转移到100mL容量瓶中,用水定容。摇匀,4℃保存,有效期为1个月。

3.4.2 标准使用溶液(50.0mg/L):准确吸取5mL标准储备溶液于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。现用现配。

3.4.3 标准系列工作溶液:分别准确吸取棉子糖标准使用溶液0mL、1mL、2mL、5mL、10mL、20mL、50mL于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。得到标准曲线工作溶液浓度分别为0.000mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、25.0mg/L。

4.仪器和设备

4.1 离子色谱仪:配置脉冲安培检测器。

4.2 天平:感量为0.1mg。

4.3 离心机:转速≥10000r/min。

4.4 涡旋混合器。

4.5 超声波清洗器。

4.6 固相萃取装置。

4.7 培养箱:60℃±2℃。

4.8 固相萃取柱: OnGuardⅡRP柱(填料为反相聚二乙烯基苯聚合物)和 OnGuardⅡH柱(填料为H型聚苯乙烯基强酸树脂),或其他等效柱。规格为1.0mL,H柱为650mg,RP柱为350mg。

4.9 0.22μm水性滤膜针头滤器。

4.10 注射器:15mL。

5.分析步骤

5.1 试样制备

5.1.1 试样预处理

5.1.1.1 乳粉、米粉、豆粉等试样:取试样约100g(其他固体试样先进行粉碎、硏磨),装亼能够容纳2倍试样体积的带盖容器中,通过反复摇晃和颠倒容器使试样充分混匀直到使试样均一化。

5.1.1.2 液体试样:取试样约100mL,装入能够容纳2倍试样体积的带盖容器中,通过反复摇晃和颠倒容器使试样充分混匀直到使试样均一化。

5.1.1.3 肉泥等其他半固体试样:称取试样50.0g,称取等量的水与之混合,涡旋混匀,超声20min。

5.2 试样处理

5.2.1 米粉等含淀粉的试样:称取混合均匀的试样1g～5g(*至0.1mg,含有棉子糖约为20mg)于离心管中,加入1gα-淀粉酶,固体试样需用约50mL45℃～50℃的水使其溶解,混合均匀后充氮,盖上管盖,置于60℃±2℃培养箱内酶解30min。冷却至室温后,用水定容至100mL。

5.2.2 乳粉、豆粉、饮料、肉泥等其他试样:称取混合均匀的试样1g～5g(*至0.1mg,含有棉子糖约为20mg)于100mL烧杯中,加水溶解,固体试样需用约50mL45℃～50℃的水使其溶解,转移到100mL容量瓶中,用水定容。

5.3 净化

5.3.1 吸取5mL经过处理的试样溶液于50mL具塞锥形瓶中,加入10mL水,摇匀,超声30min,转移到50mL容量瓶中,加入30mL乙腈,用水定容。转移到50mL离心管中,于10000r/min离心10 min,取上清液备用(可以根据样液中棉子糖含量调整稀释倍数)。

5.3.2 固相萃取柱的活化:将 OnGuardⅡRP柱使用前依次用10mL甲醇、15mL蒸馏水进行活化;onGuard ⅡH柱用10mL蒸馏水进行活化。必要时可以使用固相萃取装置,液体流速控制在1mL/min。

5.3.3 将15mL注射器的柱筒部分、0.22μm水性滤膜针头滤器、 OnGuardⅡRP柱、 OnguardⅡH柱顺序连接，接在固相萃取装置上。取备用的上清液（5.3.1）约15.0mL加入注射器柱筒，调节固相萃取装置，液体流速控制在1mL/min。弃去前面3mL流出液，收集后面的流出液待测。

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